Ni-NTA是用于純化6xHis標(biāo)簽重組蛋白的一種純化介質(zhì)，它是由4%交聯(lián)的Sepharose耦連了一種四齒螯合劑NTA而得. 它可用于在非變性或變性條件下純化任何表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)的6xHis標(biāo)簽重組蛋白。NTA，含有四個(gè)螯合區(qū)，較一般的三齒螯合劑能更好的結(jié)合Ni2+。6xHis 可與Ni2+螯合，從而使His標(biāo)簽蛋白結(jié)合在Ni-NTA純化介質(zhì)上，未結(jié)合的蛋白被洗滌下去，結(jié)合在介質(zhì)上的蛋白經(jīng)過一定濃度的咪唑或低pH緩沖液溫和的洗脫下來，從而得到高純度的目的蛋白。 該純化介質(zhì)與His標(biāo)簽蛋白具有的親力，可達(dá)5-20 mg/ml。 |
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