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改良番紅O-固綠軟骨染色液

改良番紅 O-固綠軟骨染色液
G1371
5×50ml/5×100ml
6 個(gè)月有效
軟骨組織由軟骨細(xì)胞、軟骨基質(zhì)和纖維組成，軟骨組織及其周?chē)能浌悄?gòu)成軟骨。軟骨根據(jù)基質(zhì)內(nèi)所含纖維素成分不同分為透明軟骨、彈性軟骨、纖維軟骨。軟骨染色方法有很多種，例如甲苯胺藍(lán)法、阿利新藍(lán)法、番紅 O 法等。
改良番紅 0-固綠軟骨染色法的染色原理在于嗜堿性的軟骨與堿性染料番紅 O 結(jié)合呈現(xiàn)紅色，嗜酸性的骨和酸性染料固綠結(jié)合而成綠色或藍(lán)色，與呈現(xiàn)紅色的軟骨對(duì)比鮮明，從而將軟骨組織和骨組織區(qū)分開(kāi)。番紅 O 是一種結(jié)合多陰離子的陽(yáng)離子染料，其顯示軟骨組織是基于陽(yáng)離子染料與多糖中陰離子基團(tuán)（硫酸軟骨素或硫酸角質(zhì)素）結(jié)合。番紅 O 著色與陰離子的濃度近似成正比關(guān)系，間接反映了基質(zhì)中蛋白多糖的含量和分布。當(dāng)軟骨受到損傷時(shí)，軟骨中的糖蛋白會(huì)釋放出來(lái)，使基質(zhì)成分分布不均勻，從而導(dǎo)致番紅 O 淡染或不著色。通過(guò)圖像分析軟件可對(duì)番紅 O 染色的軟骨基質(zhì)進(jìn)行定量分析。固綠與膠原纖維結(jié)合，不宜褪色。番紅 O-固綠染色的分化很關(guān)鍵，分化過(guò)度易導(dǎo)致切片不著色，分化不足易導(dǎo)致切片著色過(guò)深。
自備材料：
10%福爾馬林固定液，脫鈣液，蒸餾水，系列乙醇。
操作步驟：
1、 標(biāo)本的處理：10%福爾馬林固定、脫鈣、石蠟切片。
2、 常規(guī)脫蠟水。
3、 入新鮮配制的 Weigert 染液染色 3-5min，水洗。
4、 酸性分化液分化 15s。
5、 蒸餾水洗 10min。
6、 在固綠染色液內(nèi)浸染 5min。
7、 快速用弱酸溶液洗滌切片 10-15s，以便去除殘留的固綠。
8、 入 Safranin O stain 內(nèi)浸染 5min。
9、 分別用 95%乙醇、無(wú)水乙醇脫水。
10、二甲苯透明，光學(xué)樹(shù)脂封固。
染色結(jié)果：
軟骨基質(zhì) 深紅色
軟骨細(xì)胞核 藍(lán)色
細(xì)胞漿、肌肉、膠原纖維及骨組織 灰綠色
軟骨細(xì)胞漿 紅色
細(xì)胞核 灰黑色
注意事項(xiàng)：
1、 需要顯示細(xì)胞核時(shí)，盡量采用鐵蘇木素染色，其著色力強(qiáng)色調(diào)濃，一般的蘇木素著色力不強(qiáng)。
2、 Weigert 蘇木素染液不可預(yù)先配制后放置，配制好后一般 24h 失去染色能力。
3、 切片在 Safranin O stain 中染色不宜過(guò)長(zhǎng)，否則易導(dǎo)致背景的深紅色不易分化掉。
4、 切片分化時(shí)間應(yīng)恰當(dāng)，以背景呈綠色為宜。
5、 Safranin O stain 染色后，不宜在低濃度乙醇脫水，否則易褪色。
6、 95%乙醇脫水時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。
7、 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

相關(guān)文獻(xiàn)：

《Puerarin alters the function of monocytes/macrophages and exhibits chondroprotection in mice》 作者:Libo Peng Zikang Xie Jie Pei Bing Wang Yi Gao Yuxing Qu 期刊:Molecular Medicine Reports 影響因子:1.922 PMID:30720093
《Nano-hydroxyapatite/collagen film as a favorable substrate to maintain the phenotype and promote the growth of chondrocytes cultured in vitro》 作者:Xianfang Jiang Yanping Zhong Li Zheng Jinmin Zhao 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影響因子:2.657 PMID:29393382
 

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